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PCR實驗室污染應(yīng)急處理方法

PCR檢測因其高靈敏度、快速、操作方便等優(yōu)勢已經(jīng)被廣泛應(yīng)用，不過正是由于它靈敏度極高，極微量的污染源都有可能導(dǎo)致檢測結(jié)果的假陽性，因此，如何避免以及處理實驗室污染，對PCR人來說是一門必修課。

1、樣本間交叉污染

主要是在采（?。拥倪^程中，由于取樣工具之間的交叉造成污染；或者在核酸提取的過程中，由于移液器、離心管等使用不當(dāng)導(dǎo)致的污染。?

2、PCR試劑的污染

主要是在PCR試劑配制過程中，由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。

3、克 隆質(zhì)粒的污染

在實驗室操作中經(jīng)常會用到陽性參考品，這些陽性參考品大多數(shù)是由某些克 隆質(zhì)粒制作而成，克 隆質(zhì)粒在單位容積內(nèi)濃度高，不小心使用造成污染。

4、PCR擴增產(chǎn)物污染

這是PCR反應(yīng)中常見的污染問題?？赡茉斐蒔CR產(chǎn)物污染的形式是氣溶膠污染，在空氣與液體面摩擦?xí)r就可形成氣溶膠，據(jù)計算一個氣溶膠顆粒可含4.8萬拷貝，因而由其造成的污染是一個值得特別重視的問題。

1、若核酸樣本溢出：

立即用布或紙巾覆蓋，由外圍向z心傾倒10%的次氯酸消 毒劑，約30分鐘后，清除污染物品，再用次氯酸消 毒劑擦拭，并用75%酒精噴灑，移動紫外車定點照射1小時。

2、其他不明情況污染：

1、暫停所有實驗操作；

2、清理實驗室內(nèi)所有物品，尋找污染來源；

3、加大實驗室的通風(fēng)；

4、對實驗室內(nèi)所有表面（臺面、地面及墻面） 進行消毒；

5、75%酒精空中噴霧；

6、開啟紫外消毒裝置，延長紫外照射時間（4小時以上）；

7、以上措施每日進行，直至污染消除；用新試劑及確認無 污 染的器材進行原污染項目的試劑空白檢測，連續(xù)3次均陰性后方可進行常規(guī)檢測。